|
作者：杨宜华， 陈玉祥， 欧阳红涛
【摘要】 目的考察注射用黄芪冻干粉对大鼠和狗的长期毒性，为临床安全用药提供依据。方法大鼠和狗随机分为4个组，高、中、低剂量组连续腹腔注射或静脉注射给药13周，对照组给予同体积生理盐水。停药后观察4周。给药期和停药恢复期，观察动物的一般情况、体重增长、进食量、血液学指标、血生化指标、脏器系数及病理组织学变化等。结果与对照组比，不同剂量的给药组的检查指标统计分析均无显著差异。结论注射用黄芪冻干粉对大鼠和狗的无毒剂量分别为39.9，19.95 g /kg。
【关键词】 黄芪冻干粉； 长期毒性； 大鼠； 狗
Abstract：ObjectiveTo observe the chronic toxicity of Lyophillized powder of Radix Astragali extract (LPA) in rats and dogs and to provide evidence for clinical application. MethodsRats and dogs were divided into four groups, which were control, high-dose, moderate-dose and low-dose groups. LPA was administered by intraperitoneal injection (ip) or intravenous injection (iv) for consecutive 13 wk. NS was administered to control group. Some animals were treated for 4 wk with no administration. Overt behavior, body weights, food-intake, hematological and hemato-biochemical parameters, organ coefficients, were examined. ResultsCompared with the control group, there were no significant differences in related parameters for test groups. ConclusionSafe dose to rat and dog is 39.9 g /kg and 19.95 g /kg respectively under present study condition.
Key words：Lyophillized powder of Radix Astragali (LPA); Long term toxicity; Rat; Dog
黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，始载于《神农本草经》，是中医传统的补中益气药。它主要含有皂苷、黄酮、多糖、生物碱、氨基酸及微量元素等化学成分［1，2］。现代药理研究表明，它具有抗肿瘤、提高机体免疫功能、降血糖、调节内分泌、抗炎、利尿、降压及预防保健等作用［2］。随着制剂技术的发展，黄芪已开发制成多种剂型，如注射液、多糖脂质体、纳米微粒、胶囊等。其在临床应用广泛，对病毒性心肌炎、肺心病、肝炎、心衰、2型糖尿病等的治疗有较好的效果。本实验受试药为注射用黄芪冻干粉(LPA)，黄芪提取物的精制产品。我们对此药进行了长期毒性实验研究。
1 材料
1. 1 药品与试剂注射用黄芪冻干粉（LPA），实验药为冻干前浓缩液，红褐色，规格250 ml/瓶(相当于5 g生药/瓶)，批号0411130，由某公司提供，使用前混悬于生理盐水中，成人（60 kg计算）临床日用量0.57 g/kg；注射用生理盐水，批号0402113，250 ml/瓶，湖南双鹤药业有限公司生产。
1.2 动物SD大鼠，7～8周龄，110～130 g，♀/♂各半，中南大学实验动物学部提供，动物合格证号：医动字第024号。毕格狗，4～6月龄，♀/♂各半，广东省顺德实验动物场提供，动物合格证号：粤动合格证字115号。试验条件合格证一级，室温18～24℃，相对湿度60%～80%。
2 方法
2.1 动物的处理SD大鼠， 随机分为4组，每组20只，♀♂各半，高剂量组（39.9 g/kg）、中剂量组（15.08 g/ kg）、低剂量组（5.7 g/ kg）及对照组（生理盐水注射液）。给药体积1 ml/100 g BW，ip1次/d，每周给药6 d，连续13周。毕格狗随机分为4组，每组6只，♀♂各半。各给药组剂量为SD大鼠相应组的50%，即高剂量组（19.95 g/kg)、中剂量组（7.54 g/kg）、低剂量组（2.85 g/kg）及对照组（生理盐水注射液）。给药体积5 ml/kg BW，iv 1次/d，每周给药6 d，连续13周。
2.2 动物的观察每天记录动物的一般状况如精神状态、行为活动、毛发色泽。每周测定1次动物的体重及进食量。在第13周给药后24 h，每组随机抽取10只大鼠（♀♂各半）处死，取血作血液学及生化学检查；解剖做组织病理学检查，并计算有关脏器系数〔脏器系数（%）=脏器重量/大鼠体重×100%〕；余下的1/2大鼠停药观察4 周后处死，观察指标同前。在第13周给药后24 h，每组随机抽取4只毕格狗（♀♂各半）处死，余下的1/3毕格狗停药观察4 周后处死。在给药前、给药6周、给药13周及停药恢复17周，做血液学检查、血生化检查、心电图、尿常规的检查；在给药13周、停药恢复17周，解剖狗做组织病理学检查，并计算有关脏器系数〔脏器系数（%）=脏器重量/狗体重×100%〕。
3 结果
在给药期及恢复期，大鼠和狗无死亡，一般状况如行为活动、毛发色泽等均属正常。各给药组的动物的体重、体重增长及摄食量与同时期的对照组相比无显著差异（P>0.05）。
3.1 大鼠长期毒性实验给药期和恢复期大鼠血液细胞学所检各项指标及脏器系数与对照组相比均无显著差异（P>0.05），结果见表1～2。对大鼠血液生化指标的影响见表3。给药13周时高剂量组γ-GT高于对照组（P <0.01）；恢复期17周，中剂量组IBI高于对照组（P <0.05），但都在正常范围内变化，且无剂量相关性，故其变化并无临床意义。组织学检查结果发现给药期和恢复期各剂量组均有几例轻中度肺炎（见表4），其病理改变非为药物本身所引起，可能为病毒或细胞的感染所致，故无临床意义。
表1 大鼠的血液学检查（略）
与对照组比较，P＞0.05
表2 大鼠的脏器系数（略）
与对照组比较，P＞0.05
表3 大鼠的血生化检查（略）
与对照组比较，P＞0.05，*P＜0.05，**P＜0.01
表4 大鼠的轻中度肺炎发生例数（略）
3.2 狗的长期毒性实验给药前、给药6周、给药13周及停药恢复17周，血液学检查、血生化检查、心电图、尿常规中各项指标，给药组与对照组相比均未见明显差异（P>0.05）。给药13周和恢复期后剖杀动物，进行系统尸检，主要脏器均无肉眼可见的病理改变。狗的脏器系数结果见表5。在恢复17周低剂量组的心脏系数高于对照组，但在正常范围内。其余的脏器系数与对照组相比均无明显变化（P>0.05）。
4 讨论
LPA 是利用现代冷冻干燥技术从黄芪中提取出来的冻干粉末。冻干粉的制备成本较高，但它有独特的优点：产品疏松，能在水中溶解；含水量低，有利于长期贮存；可防止高温和氧的分解；剂量准确；最后，污染少，有利于环保。所以LPA在临床应用上前景光明。
长期毒性实验是反复多次给药的毒性实验的总称，是非临床安全性评价的重要内容。本实验给药组分为高、中、低3个剂量组及对照组。3个不同的剂量组用生理盐水配制成相应的浓度。对照组给予等体积的生理盐水。大鼠长毒实验中低剂量为稍高于有效剂量，高剂量取决于实验药的规格，中剂量为高剂量与低剂量乘积的开方而得。狗的各组剂量为大鼠相应组的50% ［3，4］。本实验未发现毒性反应的靶器官和迟发性毒性反应。在本实验条件下，黄芪冻干粉对大鼠的无毒剂量为39.9 g/kg，约相当于成人（60 kg BW）剂量的70倍；对狗的无毒剂量为19.95 g /kg，约相当于成人剂量的35倍。
表5 狗的脏器系数（略）
与对照组比较，P＞0.05，*P＜0.05
【参考文献】
［1］ 索 贞,任 敏,周好田.黄芪的化学成分及现代药理［J］.现代医院,2005,5(9):85.
［2］ 潘 燕,张 硕,张岫美. 黄芪的药理作用与临床应用研究进展［J］.食品与药品,2006,8(9):5.
［3］ 徐叔云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学,第3版［M］.北京:人民卫生出版社, 2002:227,231.
［4］ 袁伯俊,顾长虹.新药长期毒性实验的剂量设计［J］. 国外医学·药学分册, 1997,24(2):97. | 
网友评论：（只显示最新10条。评论内容只代表网友观点，与本站立场无关！）